昨日，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)張同學(xué)咨詢：ELISA結(jié)果陰性值偏高怎么回事？陰性值與抗原、抗體稀釋度，尤其是抗體的稀釋度有關(guān)嗎？與不同的酶標(biāo)板有關(guān)嗎？

技術(shù)答：可能和你底物緩沖液的PH值有關(guān)，通常是用 OPD 呈色，我們實(shí)驗(yàn)室也有人用 TMD 呈色，也碰過背景值過高的問題，后來檢討造成背景值過高的原因可能為，一是呈色時(shí)沒有避光，二是底物緩沖液的PH值不對(duì)。

一、TMB配置方法: 稱取固體 TMB 溶于 DMSO 配成 1mg/ml 液體避光保存 4度
用前要檢查其狀態(tài)，若有凝固，可用手溫將其融化。

二、底物緩沖液（Ph5.0）配置方法: 檸檬酸 1.02g，NaHPO4.12H2O 3.68g 溶于100ml水中。